ПЭМ в микробиологии

[omikron]

[Dusha]

[Dan758]

Вот метода.
Это я нарыл в открытом доступе, так что копирайты ничьи не нарушаем

The stock lead solution is made up as follows:
CALCINED LEAD CITRATE........0.20 g
Lead nitrate.....................................0.15 g
Sodium acetate...............................0.15 g
Sodium citrate................................1.00 g
Distilled water............................ 41.00 ml
The calcined lead citrate is obtained by heating crystal lead citrate for several hours in a melting pot (200°C to 300°C) until the color changes to a light brownish yellow.
NOTE: Overheated lead citrate with a dark brownish or black color can't be used.
The above reagents are placed in a 50 ml volumetric flask and mixed well to produce a yellowish milky solution. Then 9.0 ml of 1N NaOH is added to the solution and mixed well until the solution becomes clear with a light yellowish color. The solution is then transferred to an amber glass with a screw cap bottle for storage. The solution can be stored at room temperature or in the refrigerator for over 1 year.

(C) Takamasa Hanaichi et al. (1986) "A Stable Lead by Modification of Sato's Method".

[omikron]

[omikron]

Вот, действительно:
http://www.2spi.com/catalog/chem/sato_recipe.html

[Dan758]

Я конкретно по этой прописи делал - нормально получалось. Раствор стоял до 4 месяцев, грязи не было особо...
Сейчас, правда, прокаливать не в чем цитрат

[omikron]

А я готовлю из цитрата свинца производства "Serva".
Хранится не менее 3-х месяцев. Больше - не знаю, развожу по 15 мл, за этот период все трачу...

[omikron]

[Dan758]

По обычной прописи разводите? Без заморочек?
У меня, почему-то, не меньше 20 минут красить надо
Хотя, мог бы вообще не красить

[omikron]

Не, никакаих заморочек... если интересно, в личку пошлю
Кста, жду до сих пор Ваши методки заливке...

[omikron]

90 мг цитрата свинца добавляю в 15 мл воды. Туда же 8 - 9 капель 10 М р-ра едкого натра. Встряхиваю пробирку до полного р-рения цитрата свинца. Затем переливаю в 25 мл шприц и в нем храню. При окраске первую каплю сбрасываю. Окрашиваю 6-8 минут при комнатной т-ре.
Когда-то, еще в конце 80-х подобрал время окраски и теперь оно постоянное, хотя цитрат (сухой) все старее и старее.

[Dan758]

[omikron]

[Dan758]

Уважаемый omikron, а Вам версию какую желательно методов заливки?
Есть "обкатанные" под Spurr, под Epon-812, эпон-аралдит...
Все для тканевых образцов.
Конкретно по заливке даны режимы обезвоживания-пропитки, примерные схемы замешивания смол.
Фиксация - отдельной песней

[omikron]

[diatome]

кто знает что-нибудь о капиллярном методе порезки для бактерий? Я знаю что его используют когда очень мало клеток, а резать надо.
может быть есть еще какие-либо методы?
помогите, пожалуйста

[Vector]

Отсканировал замечательную книжку - Б. Уикли, Электронная микроскопия для начинающих.
http://ifolder.ru/15977669
формат DJVU, 2,7 мегабайта

Английское издание вышло в 1972-ом, русское в 1975-ом. Тем не менее, книга до сих пор актуальна и представляет собой элементарное введение в методы электронной микроскопии, ориентированное на биологов и медиков. Основной упор в изложении делается на метод ультратонких срезов с подробным обсуждением подготовки препаратов.

[omikron]

Настольная книга, можно сказать.... А еще неплоха книга John Kuo "Electron Microscopy. Metods and Protocols". Там вообще все по полочкам до мелочей.
Есть здесь в общественной библиотеке

[injener]

[omikron]

Ага, не только для просветов. В свое время в середине 70-х совершенно случайно купил в букинисте в Н-ском Академгородке, хотя тогда она мне вроде бы и нафиг не нужна была... Неисповедимы пути Господни.